解決蛇毒因子CVF原料緊缺難題，重組蛇毒因子（rCVF）助力補體抑制劑篩選

1.背景簡介：

    補體系統(tǒng)是先天免疫第一道防線，參與宿主防御、炎癥反應(yīng)、自身免疫病、缺血損傷、神經(jīng)炎癥等多種病理進程。想要精準區(qū)分補體激活的功能效應(yīng)，補體耗竭模型是經(jīng)典、通用的實驗手段，而眼鏡蛇毒因子 CVF 是構(gòu)建該模型的核心工具。

傳統(tǒng)天然CVF提取自孟加拉眼鏡蛇毒液，但眼鏡蛇屬被列入瀕危保護物種，天然毒液獲取難度逐年上升；且天然 CVF 批次差異大、雜毒素多、轉(zhuǎn)化酶易被體內(nèi)調(diào)控蛋白滅活，實驗重復(fù)性差，嚴重制約補體機制、補體抑制劑藥物篩選研發(fā)。

針對行業(yè)痛點，Hycult Biotech 推出重組眼鏡蛇毒因子 rCVF（catHC4#073），采用昆蟲細胞表達系統(tǒng)制備，功能與天然 CVF 等效，無動物毒液原料限制、活性穩(wěn)定、批間一致性高，適配體外血清處理與體內(nèi)動物造模，為補體基礎(chǔ)研究、臨床前藥效評價提供標準化、可持續(xù)的實驗工具。

2.CVF 作用機制：高效、持久耗竭補體旁路通路

CVF是補體C3的結(jié)構(gòu)與功能同源類似物，功能近似活化C3b，可在D因子、Mg2?存在下與 B 因子組裝形成CVF,Bb C3/C5 轉(zhuǎn)化酶，持續(xù)激活補體旁路通路。

和人體天然 C3b,Bb 轉(zhuǎn)化酶相比，rCVF 擁有兩大優(yōu)勢：CVF是補體C3 的結(jié)構(gòu)與功能同源類似物，功能近似活化C3b，可在D因子、Mg2?存在下B因子組裝形成CVF,Bb C3/C5 轉(zhuǎn)化酶，持續(xù)激活補體旁路通路。

和人體天然 C3b,Bb 轉(zhuǎn)化酶相比，rCVF 擁有兩大優(yōu)勢：

1)轉(zhuǎn)化酶穩(wěn)定性較強

天然 C3b,Bb 半衰期僅 1.5 分鐘，極易失活；CVF,Bb 復(fù)合物半衰期長達 7 小時，可持續(xù)水解消耗血清中全部 C3、C5，耗竭樣本補體活性。

2)耐受補體負調(diào)控蛋白

人體 H、I 因子可快速解離、滅活天然 C3b；但 CVF 轉(zhuǎn)化酶對 H、I 因子不敏感，體內(nèi)外均可穩(wěn)定維持補體耗竭狀態(tài)，造模效果穩(wěn)定、不易回彈Hycult Bio...。

rCVF 處理樣本后，血清補體耗竭，同時大量生成 C3a、C5a、sTCC（膜攻擊復(fù)合物），可模擬補體過度激活病理狀態(tài)，用于反向驗證補體在各類疾病中的作用。

產(chǎn)品應(yīng)用：

1. 體外血清補體耗竭實驗

人/小鼠/大鼠血清孵育 rCVF，制備去補體血清，用于細胞共培養(yǎng)、生物制劑補體激活風(fēng)險評估，排除補體介導(dǎo)的細胞損傷干擾。

2. 體內(nèi)動物補體耗竭造模

小動物尾靜脈注射構(gòu)建全身補體缺陷模型，用于：自身免疫腎病、葡萄膜炎、膿毒癥、急性肺損傷機制研究；腦缺血、癲癇、神經(jīng)退行性疾病神經(jīng)炎癥研究；缺血再灌注損傷、移植排斥補體機制探索。

3. 補體抑制劑藥效篩選

CVF誘導(dǎo)補體過度激活，給藥候選抑制分子后檢測 sC5b-9、通路活性，定量評價藥物阻斷旁路通路的效果。

4. 蛋白基礎(chǔ)表征實驗

可用于Western blot 驗證，SDS-PAGE 分子量約150 kDa；綿羊紅細胞溶血實驗驗證補體激活活性，配套Hycult 全系列補體通路ELISA試劑盒完成完整通路檢測。

產(chǎn)品優(yōu)勢：

1. 重組表達，不受瀕危蛇類原料限制

天然 CVF 依賴野生 / 養(yǎng)殖眼鏡蛇毒液，受保護動物法規(guī)制約，供貨不穩(wěn)定；HC4073 采用昆蟲細胞體外重組表達，量產(chǎn)穩(wěn)定、長期現(xiàn)貨，無野生動物資源依賴，符合科研倫理要求。

2. 活性與天然 CVF 等效

重組 Pro-CVF 可自發(fā)加工為成熟活性形式，三鏈結(jié)構(gòu)完整，轉(zhuǎn)化酶活性、補體耗竭能力與天然 CVF 無差異，體內(nèi)外實驗數(shù)據(jù)可直接對標傳統(tǒng)蛇毒提取產(chǎn)品。

3. 批次高度均一，實驗重復(fù)性拉滿

天然毒液組分復(fù)雜，每批次毒素、蛋白酶、內(nèi)毒素含量波動大；重組 rCVF 表達體系標準化，無雜毒素污染，批間活性差異極小，適合批量 GLP 實驗、高通量藥物篩選。

4. 耐受補體調(diào)控蛋白，造模持久穩(wěn)定

CVF 轉(zhuǎn)化酶抵抗 H/I 因子滅活，動物單次給藥即可長時間維持補體耗竭，無需多次補打，減少動物操作應(yīng)激，降低實驗誤差。

5. 配套完整補體檢測產(chǎn)品線

同品牌配套人/小鼠/大鼠/豬三通路功能 ELISA、TCC、C3/C3b/C4 定量試劑盒，CVF造模后可直接用Hycult試劑檢測補體激活水平，體系統(tǒng)一，數(shù)據(jù)可比性更強。

產(chǎn)品信息：

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